細胞名稱：143B人骨肉瘤細胞（含STR鑒定）

貨號：WS60003

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

一、細胞特性

1、 來源：骨

2、 形態(tài)：混合型，成纖維與上皮樣 貼壁生長

3、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

A. 準(zhǔn)備MEM 培養(yǎng)基 88 %，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %，MEM NEAA非必需氨基酸 1%，P/S青霉素-鏈霉素1%

血清推薦WinSera   FBS500-WP-002

B.培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

C.凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO 現(xiàn)用現(xiàn)配。

凍存液推薦WinSera  WS-1026-50ml/100ml

  儲存：液氮儲存

二、運輸和保存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

1.復(fù)蘇發(fā)貨  a.T25瓶活細胞發(fā)貨或 b.血清重懸發(fā)貨
2. 凍存管發(fā)貨(干冰發(fā)貨)  

A.1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

B.T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

三、細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。