細(xì)胞名稱:AT-3 小鼠乳腺癌細(xì)胞

貨號(hào)：WS20003（STR鑒定）

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞介紹

AT-3細(xì)胞系是從源自轉(zhuǎn)基因MTAG小鼠模型的細(xì)胞的自體乳腺腫瘤中分離的。在MTAG小鼠中出現(xiàn)的乳腺腫瘤非常類(lèi)似于在疾病發(fā)展過(guò)程中在人類(lèi)乳腺癌中觀察到的變化。MTAG小鼠模型在MMTV-LTR啟動(dòng)子的控制下表達(dá)多瘤病毒中間T抗原,腫瘤誘導(dǎo)的免疫抑制是癌癥中的常見(jiàn)現(xiàn)象，也是癌癥免疫治療的重要考慮因素。然而，大多數(shù)關(guān)于腫瘤誘導(dǎo)的免疫抑制的研究依賴于腫瘤植入模型，在該模型中，疾病進(jìn)展迅速，通常引起非生理性宿主反應(yīng)，這些反應(yīng)不能再現(xiàn)正常的腫瘤發(fā)展和進(jìn)展。因此，產(chǎn)生原位腫瘤的模型對(duì)于提供更具生理學(xué)相關(guān)性的系統(tǒng)來(lái)研究腫瘤-宿主相互作用和長(zhǎng)期免疫抑制效應(yīng)是有價(jià)值的。AT-3細(xì)胞是用于腫瘤生理學(xué)研究的有用的小鼠模型，腫瘤生理學(xué)是人類(lèi)典型疾病狀態(tài)的代表。

一、細(xì)胞特性

1） 來(lái)源:MTAG小鼠  乳腺腫瘤

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣  貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二、運(yùn)輸和保存 

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。 

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 

三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 

1）準(zhǔn)備DMEM（推薦WS-P-0002）培養(yǎng)基； 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%;

注意：AT-3細(xì)胞在培養(yǎng)中表現(xiàn)出不同的形態(tài)。

血清我們推薦FBS500-WP-002

注：具體培養(yǎng)方式以隨貨說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)！?。。?/span>

1）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

2）3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

四、傳代方法

收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細(xì)胞脫落后，加入2ml 以上完全培養(yǎng)基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。